大鼠 ELISA 試劑盒是一種用于檢測大鼠體內特定蛋白質、抗原或抗體的實驗工具，廣泛應用于生物醫學研究、開發等領域。以下是關于大鼠 ELISA 試劑盒的詳細說明：
檢測原理：以雙抗體夾心 ELISA 法為例，用抗大鼠目標分子的抗體包被于酶標板上，樣品或標準品中的目標分子與包被抗體結合，游離成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠目標分子抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，形成免疫復合物，再次洗去游離成分。加入顯色底物（TMB），TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在 450nm 波長處測 OD 值，目標分子濃度與 OD450 值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中目標分子的濃度。
試劑盒組成：以 96 孔配置的大鼠單胺氧化酶 A（MAOA）ELISA 試劑盒為例，通常包括 96 孔酶標板、塑料膜板蓋、標準品、標準品稀釋緩沖液、生物素標記的抗體、酶標記物、洗滌緩沖液、底物 A、底物 B、終止液、標本稀釋液等。
規格與保存：常見規格有 96T 和 48T。保存溫度一般為 2-8℃，有效期通常為 6 個月。
樣本要求：可檢測的樣品形式包括血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清、相關生物液體等。樣品如果不立即分析，應分裝后冷凍保存，且避免反復凍融。如血清需使用不含熱原的試管，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞分離；血漿可用 EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000 轉離心 30 分鐘取上清等。
操作步驟：
準備工作：試劑盒從冰箱取出后，需在室溫平衡 20 分鐘。
加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；樣本孔加待測樣本 50μL，若樣本需要稀釋，先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL，空白孔不加。
溫育：除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
洗板：手工洗板時，甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次；自動洗板機則每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
顯色：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
終止：每孔加入終止液 50μL。
測定：15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
計算：在 Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應 OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
注意事項：
實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；若樣本已經稀釋，結果需乘以相應的稀釋倍數才是樣本實際濃度。
嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

所有液體組分使用前充分搖勻。

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